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培养板的使用

培养板的使用

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【摘要】:
培养板适用于各种动物细胞培养,其高透明表面平整均匀,保证了无需表面处理即可用显微镜观察拆解悬浮细胞培养物的无菌包装。

  培养板适用于各种动物细胞培养,其高透明表面平整均匀,保证了无需表面处理即可用显微镜观察拆解悬浮细胞培养物的无菌包装。

  使用培养板时,加入的培养基液面不能太深,一般在2-3mm范围内,结合孔底面积可以计算出合适的液量。如果液体量太大,会影响气体(氧气)的交换,在移动过程中容易溢出,造成污染。

  1.混合培养板培养法:无菌培养板编号为10-7、10-8、10-9.每个编号重复三次。按无菌操作要求,用无菌吸管吸取1ml 10-9稀释液,置于编号为10-9的三个平板中,用同样方法吸取1ml 10-8稀释液,再吸取10-7稀释液。然后,将已融化并冷却至45-50℃的细菌培养液分别倒入9个平板中,轻轻转动平板,使菌液与培养液混合均匀。然后,将溶液浓缩并倒置,并在合适的温度下培养。并且可以在菌落生长出来后进行计数。

  2.涂片计数法与混合法基本相同。不同的是,培养基是趁热融化,倒入无菌培养皿中,凝固后编号。然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液,接种于不同稀释数的琼脂平板上(每个数设置重复3次)。然后用无菌抹刀将菌液均匀涂抹在平板上,每次稀释使用无菌抹刀。更换稀释剂时,请燃烧抹刀进行灭菌。从低浓度到高浓度涂抹时,刮刀不能更换。

  将涂抹好的平板放在桌子上20-30分钟,使菌液渗入培养板,然后将平板倒置,保温培养,待菌落生长后计数。扩展数据菌落形态包括菌落大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明度。在一定条件下,每个细菌形成一个固定的菌落特征。不同物种或同一物种在不同培养条件下的群体特征不同,这些特征对菌株的鉴定有一定的意义。

  细胞形态是群体形态的基础,群体形态是群体聚集时细胞形态的反映。细菌是原核微生物,所以形成的菌落也小;个别细菌充满水分,整个菌落显得潮湿,容易被接种环刺 激;球菌形成凸起的菌落;鞭毛细菌经常形成边缘不规则的菌落;有荚膜的菌落表面透明,边缘光滑整齐。

  孢子表面干燥起皱;一些能产生色素的菌落也呈现鲜艳的颜色。大肠杆菌在普通琼脂培养基上也一样,边缘规则圆,表面光滑,半透明,有小突起。典型的大肠杆菌在伊红蓝琼脂平板上呈深紫色和黑色,菌落光滑、湿润、圆形、有金属光泽。