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培养板如何使用

培养板如何使用

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【摘要】:
培养板适用于各种动物细胞培养,高透明度表面平整均匀,确保显微镜观察无需表面处理即可用于悬浮细胞培养无菌包装的拆卸。培养板使用时添加的培养基液面不宜过深,一般在2-3mm范围内,结合孔底面积即可计算出合适的液体量。如果液体量过大,会影响气体(氧气)的交换,在移动过程中容易溢出造成污染。

培养板适用于各种动物细胞培养,高透明度表面平整均匀,确保显微镜观察无需表面处理即可用于悬浮细胞培养无菌包装的拆卸。

培养板使用时添加的培养基液面不宜过深,一般在2-3mm范围内,结合孔底面积即可计算出合适的液体量。如果液体量过大,会影响气体(氧气)的交换,在移动过程中容易溢出造成污染。

1.混合培养板培养法:无菌培养板编号为10-7、10-8和10-9,每个编号重复三次。根据无菌操作的要求,用无菌吸管吸取1毫升10-9稀释液,放入编号为10-9的三个平板中,用同样的方法吸取1毫升10-8稀释液,再吸取10-7稀释液。然后,将已融化并冷却至45-50的细菌培养液分别倒入9个平板中,轻轻旋转平板以使细菌溶液与培养液混合均匀,然后将溶液浓缩后倒置,并在合适的温度下培养。而计数可以在菌落长出后进行。

2.涂抹板计数法与混合法基本相同。区别是培养基趁热融化倒入无菌培养板,凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液,接种在不同稀释数的琼脂平板上(每个编号设定3次重复)。然后用无菌抹刀将菌液均匀涂抹在平板上,每次稀释用灭菌抹刀。更换稀释液时,将抹刀烧掉灭菌。从低浓度应用到高浓度时,刮刀不可更换。

将涂抹好的平板放在桌子上20-30分钟,使菌液渗透到培养板中,然后将平板倒置,保温培养,菌落生长后计数。扩展数据菌落形态包括菌落大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明度。在一定条件下,每种细菌形成一个固定的菌落特征。不同物种或同一物种在不同培养条件下的群体特征是不同的,这些特征对于菌株的鉴定和鉴定具有一定的意义。

细胞形态是群体形态的基础,群体形态是群体聚集时细胞形态的反映。细菌是原核微生物,所以形成的菌落也小;细菌个体充满水分,整个菌落显得湿漉漉的,容易被接种环激怒;球菌形成凸起的菌落;鞭毛细菌往往形成边缘不规则的菌落;有胶囊的菌落表面透明,边缘光滑整齐。

孢子菌落表面干燥起皱;一些能产生色素的菌落也显示出明亮的颜色。大肠杆菌在普通琼脂培养基上也是一样,边缘规则圆形,表面光滑,半透明,小突起;典型的大肠杆菌在曙红蓝琼脂平板上表现为深紫色黑色,菌落光滑、湿润、圆形,有金属光泽。